| Purification et extraction
Dès que le laboratoire génétique reçoit les échantillons biologiques prélevés, tous les scientifiques se mettent au travail afin d'en extraire l'ADN. Le protocole expérimental général de l'extraction est le suivant : Tout d’abord, on commence par une lyse des cellules, puis une élimination des protéïnes et des acides nucléiques autres que l’ADN tels que l’ARN etc... Enfin, on fait une concentration de l’ADN par une précipitation à l’alcool (éthanol) Il y a de nombreux types d'ADN qui varient selon leur provenance, par exemple de l’ADN génomique, c’est-à-dire en provenance des chromosomes, ou bien de l’ADN plasmidique, c’est-à-dire provenant de plasmides (le plus souvent portés par des cellules bactériennes). Différentes variantes d'extraction sont utilisées en fonction de la provenance de l’ADN.
Nous ne verrons ici que l'extraction de l'ADN génomique, seul porteur de l'information génétique. . Extraction de l'ADN génomique : On commence par une lyse des cellules ou des tissus, consistant en un broyage, suivie d'une extraction par des détergents, qui vont dégrader les membranes et les protéines, en particulier celles associées à l'ADN dans la chromatine . La solution obtenue est en général très visqueuse et l'ADN ainsi libéré forme de très longs filaments. L'étape suivante est la déprotéïnisation de la solution qui se fait par une extraction au moyen de solvants organiques, en général du phénol additionné de chloroforme. Les protéines dénaturées forment un précipité à l'interface phénol-eau, tandis que l'ADN reste en solution dans la phase aqueuse et surnage à la surface de la solution. On récupere uniquement la phase surnageante par décantation : l'ADN est purifié. En classe de seconde nous avons appris à extraire de l'ADN d'oignon : 
L'extraction de l'ADN est suivie de l'amplification grâce à la PCR : (Clic ) Supprimer les publicités sur ce site pendant 1 an
|